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熒光顯微鏡的濾光片截止深度為什么要做到OD6?

2021/08/27 NMOT

近年來隨著生命科學技術熒光探針技術、熒光顯微鏡、偏振熒光檢測技術、多光子熒光檢測技術、PCR基因擴增熒光定量檢測等生物醫學檢測技術不斷涌現,對熒光濾光片的陡度、背景深度提出了更高的技術要求。

熒光試劑受激發射熒光的持續時間很短暫:發射熒光亮度相當于激發光能量的千分之一到萬分之一的量級,相對于激發光,熒光就顯得非常的微弱,二者共存于測試樣品中;并且熒光的激發光譜與發射光譜波長間隔很小(15nm-30nm左右),所以我們要檢測到熒光信號,要把熒光系統中的激發光與發射光在光譜中相互深度隔離。隔離度達到OD4以上,才能檢測到樣品發射的熒光信號。為提高熒光檢測準確度,需要將隔離度提高到OD5以上。而且濾光片的隔離度越高,微量熒光的探測能力越強,熒光顯微鏡檢測精度越高。

所以在熒光顯微鏡的濾光片的核心要求就是高截止陡度、濾光片高透過率、濾光片鄰域背景截止度。

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